نیوروپپٹائڈ Y (NPY) کا پتہ لگانے کا انحصار بنیادی طور پر امیونولوجیکل طریقوں پر ہوتا ہے، بشمول مقداری تجزیہ کے لیے انزائم-لنکڈ امیونوسوربینٹ پرکھ (ELISA) اور ٹشو لوکلائزیشن کے لیے امیونو ہسٹو کیمسٹری (IHC)۔
ELISA حیاتیاتی نمونوں جیسے انسانی سیرم، پلازما، ٹشو ہوموجینیٹس، سیل لائسیٹس، اور سیل کلچر سپرنٹینٹس میں NPY سطحوں کے مقداری تعین کے لیے عام طور پر استعمال شدہ طریقہ ہے۔ یہ عام طور پر مسابقتی روک تھام کے اصول کو استعمال کرتا ہے: NPY مونوکلونل اینٹی باڈیز کو ایک مائکروپلیٹ پر لیپ کیا جاتا ہے، اور بایوٹین-لیبل لگا ہوا اینٹیجن اور ٹارگٹ اینٹیجن پر مشتمل نمونہ دونوں کو شامل کیا جاتا ہے۔ ٹارگٹ اینٹیجن اینٹی باڈیز کے پابند ہونے کے لیے لیبل والے اینٹیجن سے مقابلہ کرتا ہے۔ دھونے کے قدم کے بعد، HRP-لیبل لگا ہوا ایوڈن اور سبسٹریٹ ٹی ایم بی رنگ کی نشوونما کے لیے شامل کیے جاتے ہیں۔ رنگ کی شدت نمونے میں NPY ارتکاز کے الٹا متناسب ہے۔ یہ طریقہ 24.69 pg/mL سے 2000 pg/mL کی عام پتہ لگانے کی حد اور 9.59 pg/mL سے کم پتہ لگانے کی حد کے ساتھ، اعلی حساسیت اور مخصوصیت پیش کرتا ہے۔
IHC کا استعمال ٹشو سیکشنز کے اندر NPY کے اظہار اور تقسیم کو مقامی بنانے کے لیے کیا جاتا ہے۔ ٹشو میں NPY سے منسلک ہونے کے لیے مخصوص اینٹی باڈیز کا استعمال کرتے ہوئے اور تصور کے لیے ایک کروموجینک رد عمل کا استعمال کرتے ہوئے، یہ طریقہ مختلف ٹشوز میں NPY اظہار کے کوالٹی یا نیم-مقدار تجزیے کو قابل بناتا ہے۔
